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小鼠原代海馬神經(jīng)干原代細胞

商品屬性：

細胞基本屬性：

種屬來源：小鼠

組織來源：腦腦

生長特性：懸浮生長

產品規(guī)格：5x105cells/T25或1mL凍存管
換液頻率：每2-3天換液一次

消化液：

產品貨期：5-6周左右

運輸方式：T25培養(yǎng)瓶/ 順豐快遞（包郵）

供應限制：僅限于科學研究，絕不可作為動物或人類疾病的治療產品使用

背景介紹：:海馬體主要負責記憶和學習，日常生活中的短期記憶都儲存在海馬體中。

干細胞的研究是當前生命科學的熱點，而作為干細胞重要分支的神經(jīng)干胞更以其可自我更新和增殖、分化產生中樞神經(jīng)類神經(jīng)細胞的多分化潛能，在神經(jīng)損傷修復和退行性疾病治療等方面具有著巨大的應用潛勢。神經(jīng)干細胞（ｎｅｕｒａｌ　ｓｔｅｍ?。悖澹欤欤?，ＮＳＣｓ）的發(fā)現(xiàn)，為中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病的治療帶來了新的手段。ＮＳＣｓ是指中樞神經(jīng)系統(tǒng)中具有自我更新、自我增殖及多向分化潛能的一類細胞。研究表明，胚胎、新生及成年哺乳動物的室管膜下區(qū)、海馬、紋狀體、中腦、臭球和脊髓等部位都存在神經(jīng)干細胞。隨著ＮＳＣｓ研究的深入，離體培養(yǎng)的ＮＳＣｓ已經(jīng)成為常用的一種的基礎工具。

細胞培養(yǎng)操作：

收貨處理取出T25細胞培養(yǎng)瓶，用75%酒精消毒瓶身，拆下封口膜，放入37℃、5%CO2，飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h，以穩(wěn)定細胞狀態(tài)

傳代密度細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)

傳代代數(shù)可傳5代左右；3代以內狀態(tài)

傳代比例傳代建議1：2傳代，1:2傳代就是1個T25瓶傳2個T25瓶或者2個6cm皿。不是1個T25瓶傳2個10cm皿

傳代方法：

1.吸出T25細胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用PBS清洗細胞一次；

2.添加0.25%消化液1mL至T25培養(yǎng)瓶中，輕微轉動培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個培養(yǎng)瓶底后，吸出多余消化液，37℃溫浴1-3min；倒置顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后，再加入5ml培養(yǎng)基終止消化；

3.用吸管輕輕吹打混勻，按1:2比例接種T25培養(yǎng)瓶傳代，然后補充新鮮的培養(yǎng)基至5mL，置于37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)；

4.待細胞貼壁后，培養(yǎng)觀察；之后每2-3天換液一次新鮮的培養(yǎng)基。

原代細胞培養(yǎng)的主要步驟包括：

?一、剝離組織，去除外膜、結締組織等?：將組織從動物體中取出，并去除可能存在的外膜或結締組織等雜質。

二、?洗滌后將組織剪成1mm左右的小塊?：使用生理鹽水或其他適當?shù)木彌_液洗滌組織，然后將其剪成約1mm大小的小塊。

三、?用0.1%～0.2%的消化?：將剪碎的組織塊加入含有0.1%～0.2%的緩沖液中，進行消化。消化時間可根據(jù)具體實驗需求選擇熱消化（37℃）或冷消化（4℃），熱消化時間短，冷消化時間長但條件更溫和。

?四、吹打分散后，過濾、計數(shù)?：將消化后的細胞吹打到一個離心管中，然后過濾、計數(shù)。

五、?按30萬/毫升分瓶培養(yǎng)?：將計數(shù)后的細胞按30萬/毫升的濃度分瓶培養(yǎng)。

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